Joyau de style gothique flamboyant, elle fut sculptée par des flamands en 1491 sur ordre de Charles VIII (avant que ce dernier ne découvre les merveilles d'Italie).

Cette chapelle servit d'oratoire à la reine de France Anne de Bretagne qui vécut au château d'Amboise durant son mariage avec Charles VIII.

Elle renferme les restes (présumés) de Léonard de Vinci, mort à Amboise au Clos-Lucé.